Aim. To study a contribution of polymorphism A-8202G (rs11697325) of a gene of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in development of arterial hypertension (AH) in patients with the rheumatoid arthritis (RA).
Materail and methods. 143 patients with RA were examined, among which a group of patients with RA without AH (n=50) and a group of patients with RA in association with AH (n=93) were identified. Healthy volunteers (n=151) were also divided into 2 groups comparable in age, sex and number with the main groups (control group 1 – n=54, control group 2 – n=97). The work used a range of clinical, laboratory, instrumental methods. A molecular genetic study was also performed. Blood samples were taken from all study participants. DNA isolation was carried out by the standard phenol-chloroform method. Genotyping for the MMP-9 gene was performed by PCR-RFLP analysis (polymerase chain reaction – restriction fragment length polymorphism). PCR was carried out with a set of primers to the corresponding regions of the genome. PCR products were analyzed by electrophoresis in 4% polyacrylamide gel followed by staining with ethidium bromide.
Results. In the course of a molecular genetic study, a statistically significant predominance of the homozygous AA genotype and the A allele of the MMP-9 (rs11697325) gene polymorphism was observed in the group of patients with RA, both separately and in association with AH, in comparison with the data of control groups. The risk of developing RA estimated by the odds ratio (OR) in carriers of the AA genotype of the MMP-9 gene is 1.8 times higher (95% confidence interval – CI – 1.136–2.950; p=0.02) than in carriers of the GG and GA genotypes; in carriers of the A allele, the risk of developing RA is 1.6 times higher compared to the G allele (95% CI 1.119–2.578; p=0.01). The OR risk of developing RA in association with hypertension in carriers of the AA genotype of the MMP-9 gene is 2.8 times higher (95% CI 1.283–6.54; p=0.04) compared to GA and GG genotypes, 2.1 times higher in carriers of the A allele (95% CI 1.113–4.127; p=0.02) compared to the G allele.
Conclusion. Thus, the results of the study indicate that the homozygous AA genotype and the A allele of the MMP-9 (rs11697325) gene polymorphism are the predictors of the development of RA both as a separate nosological unit and in association with AH.
Цель. Определить роль полиморфизма A-8202G (rs11697325) гена матриксной металлопротеиназы-9 (ММР-9) в развитии артериальной гипертензии (АГ) у пациентов с ревматоидным артритом (РА).
Материал и методы. Обследованы 143 больных РА, среди которых выделены группа пациентов с РА без АГ (n=50) и группа больных с РА в ассоциации с АГ (n=93). Здоровых добровольцев (n=151) также разделили на 2 группы, сопоставимые по возрасту, полу и числу участников с основными группами (контрольная группа 1 – n=54, контрольная группа 2 – n=97). В работе использован спектр клинических, лабораторных, инструментальных методов исследования. Также проводили молекулярно-генетическое исследование. У всех участников исследования взяты образцы крови. Выделение ДНК проводили стандартным фенол-хлороформным методом. Генотипирование по гену MMP-9 осуществляли методом ПЦР-ПДРФ-анализа (полимеразная цепная реакция – полиморфизм длин рестрикционных фрагментов). ПЦР выполняли с набором праймеров к соответствующим районам генома. Продукты ПЦР анализировали посредством электрофореза в 4% полиакриламидном геле с последующим окрашиванием бромистым этидием.
Результаты. В ходе молекулярно-генетического исследования наблюдали статистически значимое преобладание гомозиготного генотипа AA и аллеля A полиморфизма гена MMP-9 (rs11697325) в группе пациентов с РА как отдельно, так и в ассоциации с АГ в сравнении с данными лиц контрольных групп. Оценённый по отношению шансов (ОШ) риск развития РА у носителей генотипа АА гена MMP-9 оказался в 1,8 раза выше (95% доверительный интервал – ДИ – 1,136–2,950; р=0,02), чем у носителей генотипов GG и GA; у носителей аллеля A риск развития РА – в 1,6 раза выше по сравнению с аллелем G (95% ДИ 1,119–2,578; р=0,01). Оценённый по ОШ риск развития РА в ассоциации с АГ у носителей генотипа AA гена MMP-9 выше в 2,8 раза (95% ДИ 1,283–6,54; р=0,04) по сравнению с генотипами GA и GG, у носителей аллеля A – в 2,1 раза выше (95% ДИ 1,113–4,127; р=0,02) по сравнению с аллелем G.
Заключение. Результаты исследования свидетельствуют о том, что гомозиготный генотип АА и аллель А полиморфизма гена MMP-9 (rs11697325) служат предикторами развития РА как в виде отдельной нозологической единицы, так и в ассоциации с АГ.